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CASPASE-3活性檢測試劑盒

  • 型   號:
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-08-25
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

Caspase-3是凋亡過程中Z主要的終末剪切酶,因而也是研究Z多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特異水解多種凋亡關鍵蛋白如PARP,介導細胞核染色質(zhì)固縮、凋亡小體生成、核DNA斷裂。試劑盒測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA),釋放硝基苯胺pNA。

 Caspase-3是凋亡過程中zui主要的終末剪切酶,因而也是研究zui多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特異水解多種凋亡關鍵蛋白如PARP,介導細胞核染色質(zhì)固縮、凋亡小體生成、核DNA斷裂。試劑盒測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA),釋放硝基苯胺pNA。游離硝基苯胺pNA呈黃色在405 nm具有zui大吸收峰,用普通可見光分光光度比色方法測定。根據(jù)pNA標準管吸光度OD值和標準曲線,計算來自底物肽釋放的pNA濃度,得到Caspase-3水解活性。反應體系100微升,試劑盒提供的試劑,除標準曲線外可進行50100次樣品測定。


適用:測定哺乳動物組織、細胞caspase-3活性。

組成與儲存:
1. 裂解緩沖液: 30 ml ,4 ºC
2.
反應緩沖液: 20 ml ,4 ºC
3. 2 mM Ac-DEVD-pNA
底物: 0.5 ml,-20 ºC避光
4. 10 mM pNA標準品: 0.5 ml,-20 ºC避光
以上標出的量為100次檢測,50次檢測的試劑量減半。試劑常溫運輸。到達后按要求儲存,1年內(nèi)穩(wěn)定。

所需儀器:
酶標儀與96孔酶標板;或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。
工作波長:zui大吸收波長405 nm,如不具備也可在400~450 nm范圍內(nèi)測定。

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