瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取
本試劑盒適用于從 TAE 或 TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段,使用本產品可回收 100bp-10kb 大小的DNA 片段,回收率可達 85%-95%。該試劑盒操作簡便,得到的 DNA 片段可用于酶切、連接、測序等實驗。瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取
Gel DNA Purification Kit
瓊脂糖凝膠純化回收試劑盒
瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取
目錄號:43011
產品內容:
產品組成 | 43011-50 | 43011-100 | 43011-200 |
Buffer BL | 5 ml | 10 ml | 20 ml |
Buffer DB | 40 ml | 75 ml | 150 ml |
Buffer WB | 13 ml | 25 ml | 50 ml |
Buffer EB | 10 ml | 15 ml | 20 ml |
Spin Column With Collection Tubes | 50 套 | 100 套 | 200 套 |
自備試劑:
無水乙醇
保存條件:
室溫(15 ~ 25℃)
產品簡介:
本試劑盒適用于從TAE 或 TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段,使用本產品可回收 100bp-10kb 大小的DNA 片段,回收率可達 85%-95%。該試劑盒操作簡便,得到的 DNA 片段可用于酶切、連接、測序等實驗。
產品特點:
1. 快速:步驟少,操作簡便,整個操作僅需 15 分鐘。
2. 高效:每個離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段,回收效率在 85%以上。
注意事項:
1. Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩定性,消除高溫潮濕或其他不良環境因素對吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個月內,不用做柱平衡。
2. 使用前請先檢查Buffer BL、Buffer DB 是否出現渾濁,如有混濁現象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復澄清。
3. 切膠時,紫外照射時間應盡量短,以免對 DNA 造成損傷。
4. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關,初始量越少、洗脫體積越小,回收率越低。
操作步驟
第一次使用前,請先在 Buffer WB 中加入無水乙醇,并打對勾標記,加入體積請參照瓶上的標簽。
從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段
1. 柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 100 ul Buffer BL,12,000 rpm 離心 1 min,棄濾液,將吸附柱重新放回收集管中。(請使用當天處理過的柱子)
2. 切膠:在長波紫外燈下,用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,盡量切除不含 DNA 的凝膠。
3. 稱重:將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠,放入 1.5 ml 離心管中,稱取凝膠重量(去除空管重量)。如果凝膠重量為 100mg,其體積可視為 100ul。
4. 溶膠:加入 3 倍體積 Buffer DB,56℃水浴,直到凝膠wan全溶解,期間顛倒混勻 2 次加速溶膠。
(如果凝膠濃度大于 2%,應加入 6 倍體積 Buffer DB。對于回收<100 bp 的小片段,可在凝膠wan全溶解后,再加入 1.5 倍膠塊體積的異丙醇以提高回收率。)
5. 吸附:待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中,室溫靜置 1 min,然后 12,000 rpm 離心 1 min,棄濾液。
(如果總體積超過 750 ul,可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中)
6. 漂洗:加入 600 ul 漂洗液Buffer WB,12,000 rpm 離心 1 min,棄濾液。
7. 二次漂洗:重復操作步驟 6。
8. 干燥:將吸附柱放回收集管中, 12,000 rpm 離心 2 min,甩干膜上殘留的乙醇,防止其抑制下游反應。
9. 回收:將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中,在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB,室溫放置 2 min,12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段。
(注意:為增加回收效率,可將洗脫液在 65℃預熱,也可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置 2 min,再次離心收集。)
瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取