微量DNA濃縮回收試劑盒 核酸提取
本試劑盒為超微量 DNA 濃縮回收的專用試劑盒。適用于微量 DNA 的瓊脂糖凝膠 DNA 回收、PCR 反應(yīng)產(chǎn)物純化回收、酶切產(chǎn)物 DNA 片斷純化回收、探針標(biāo)記后純化回收、DNA 樣品濃縮等。微量DNA濃縮回收試劑盒 核酸提取
DNA Purification micro Kit
微量 DNA 濃縮回收試劑盒
微量DNA濃縮回收試劑盒 核酸提取
目錄號(hào):43016
產(chǎn)品內(nèi)容:
產(chǎn)品組成 | 43016-100 |
Buffer BL | 5 ml |
Buffer DB | 40 ml |
Buffer WB | 13 ml |
Buffer EB | 10 ml |
microSpin Column With Collection Tubes | 100 套 |
自備試劑:
無(wú)水乙醇
保存條件:
室溫(15 ~ 25℃)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒為超微量 DNA 濃縮回收的專用試劑盒。適用于微量 DNA 的瓊脂糖凝膠 DNA 回收、PCR 反應(yīng)產(chǎn)物純化回收、酶切產(chǎn)物 DNA 片斷純化回收、探針標(biāo)記后純化回收、DNA 樣品濃縮等。使用本產(chǎn)品可回收 100bp-5kb 大小的 DNA 片段,回收率可達(dá) 85%-95%。該試劑盒操作簡(jiǎn)便,得到的DNA 片段可用于酶切、連接、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 特殊微量 5μg 離心柱設(shè)計(jì)可以zui低 5μl 洗脫,保證了回收 DNA 的高濃度。
2. 特殊無(wú)墊圈離心柱的設(shè)計(jì),最大限度減少了無(wú)液體殘留和污染,保證了回收 DNA 的高純度。
3. 快速:步驟少,操作簡(jiǎn)便,整個(gè)操作僅需 15 分鐘。
注意事項(xiàng):
1. Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性,消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對(duì)吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個(gè)月內(nèi),不用做柱平衡。
2. 使用前請(qǐng)先檢查Buffer BL、Buffer DB 是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。
3. 切膠時(shí),紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對(duì) DNA 造成損傷。
4. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越小,回收率越低。
操作步驟:
第一次使用前,請(qǐng)先在 Buffer WB 中加入無(wú)水乙醇,并打?qū)礃?biāo)記,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。
一、從瓊脂糖凝膠中回收DNA 片段
1. 柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 50 ul Buffer BL,12,000 rpm 離心 1 min,棄濾液,將吸附柱重新放回收集管中。(請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子)
2. 切膠:在長(zhǎng)波紫外燈下,用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,盡量切除不含 DNA 的凝膠。
3. 稱重:將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠,放入 1.5 ml 離心管中,稱取凝膠重量(去除空管重量)。如果凝膠重量為 100mg,其體積可視為 100ul。
4. 溶膠:加入 3 倍體積 Buffer DB,56℃水浴,直到凝膠wan全溶解,期間顛倒混勻 2 次加速溶膠。
(如果凝膠濃度大于 2%,應(yīng)加入 6 倍體積 Buffer DB。對(duì)于回收<100 bp 的小片段,可在凝膠wan全溶解后,再加入 1.5 倍膠塊體積的異丙醇以提高回收率。)
5. 吸附:待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中,室溫靜置 1 min,然后 12,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液。
(如果總體積超過(guò) 750 ul,可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中)
6. 漂洗:加入 300ul漂洗液Buffer WB,12,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液。
7. 二次漂洗:重復(fù)操作步驟 6。
8. 干燥:將吸附柱放回收集管中, 12,000 rpm 離心 2 min,甩干膜上殘留的乙醇,防止其抑制下游反應(yīng)。
9. 回收:將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 離心管中,在微量吸附柱的膜中央加入 10 ul (5 ~ 25 ul)洗脫液Buffer EB,室溫放置 1 min,12,000 rpm 離心 1 min。
(注意:為增加回收效率,可將洗脫液在 65℃預(yù)熱,也可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置 1 min,再次離心收集。)
微量DNA濃縮回收試劑盒 核酸提取